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凝血酶原时间(PT)检测试剂

用途:
PT试剂用于外源性凝血途径的筛选试验,主要考查患者血浆中维生素K依赖性凝血因子Ⅱ(凝血酶原)、凝血因子Ⅶ和凝血因子Ⅹ,以及非维生素 K依赖性凝血因子Ⅴ和凝血因子Ⅰ(纤维蛋白原)的水平。

原理:
PT试剂中含有凝血活酶、磷脂、钙离子等成分。当与血浆接触时,血浆中的凝血因子Ⅶ立即被激活,启动外源性凝血途径,使血浆发生凝固。从接触到血浆开始凝固的时间叫做血凝时间。血凝时间长短反应血浆内凝血因子水平的高低。

组成:组织凝血活酶和稳定剂
外观:乳白色悬浮溶液;
特点:①液体型; ②高活性; ③高敏感; ④高稳定。

液体型
① 无需复溶,简化操作程序;
② 不存在瓶间差问题;
③ 降低了操作误差;
④ 提高了检测精度和准确性。

高活性
高活性是指,PT试剂测定正常血浆的血凝时间较短。
实现高活性的基础是:
①组织因子在磷脂膜上有正确取向;
②不存在或极少无效的凝血活酶和磷脂;
③钙离子平衡达到最佳状态。

高敏感性
高敏感是指,患者血浆PT值与正常血浆PT平均值之比接近或等于患者血浆的INR值(国际标准化比率)。
敏感度低的主要原因:
①凝血因子污染;
②有效成分破坏。
天岳的特殊生产工艺彻底消除了外来凝血因子,同时又避免了主要成分的损失。

高稳定性
PT中的主要活性成分是凝血活酶,它与磷脂微粒紧密结合,再加上二价钙离子的作用,形成了一种刚性结构,赋予它的高度稳定特点。
国际敏感指数
目前各国在口服华法林类抗凝药物时,已广泛使用国际标准化比率(INR)作为控制用药量的指标(朱忠勇,Chin J Med Lab Sci,1998,Vol 21, No.5)。
INR=PTR ISI
式中,PTR=异常PT/MNPT,MNPT=正常PT均值。 ISI值等于1时,INR=PTR。试剂的ISI无论大于1还是小于1, PT/MNPT都会偏离INR值。ISI值偏离越大, PTR与INR的差值就越大。
ISI值的测定

利用美国德灵公司(DADE BEHRING)校准的INR血浆(PT-Multi Calibrator, Code No. OPAT 035)在全自动和半自动血凝仪上测定本公司生产的PT试剂,国际敏感指数(ISI值)通常为1.0~1.3。 PT试剂的敏感性直接影响血浆INR测定结果。试剂敏感性越低,在ISI标示值不准确情况下,血浆INR测定值与实际值相差越悬殊。 临床实践证明,使用低ISI值的PT试剂较使用高ISI 值的PT试剂可获得更加准确的结果(刘贵建等,临床检验杂志,2004年,第22卷,第2期)。 但ISI值并非越低越好,ISI接近或等于1.0才是最理想的,因为PT试剂国际标准品的ISI=1。 此外,用PT衍生法测定血浆纤维蛋白原含量,必须用高敏感PT试剂。通常ISI值应小于1.4。因为定标时需要将血浆进行一系列稀释,同时用PT试剂测定各个稀释点的光密度或血凝时间。如果试剂的敏感度低,反应液的光密度或血凝时间响应就差,无法准确测定。 图2为本公司PT试剂在HemoClot MC-1000plus血凝仪上所作的定标曲线。


PT试剂稳定性试验 为快速考查试剂稳定性,往往进行加速变性试验,即提高温度或改变环境条件,有意促使试剂中的有效成分发生变化。将本公司PT试剂置于41℃存放,观察正常质控血浆血凝时间变化情况,如果PT失活,则血凝时间延长。血凝时间越长,说明失活越严重(如图所示)。


据文献报道(US Patent 5,217,873),液体酶试剂41℃存放3天相当于4℃存放18个月。 另外,本公司开发的“抗冻PT”试剂可反覆冻融。该特点为寒冷地区的运输提供了方便。